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阻止移液錯誤破壞實驗的 17 種方法

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如果您在工作臺上工作,準確的移液至關重要。如果沒有準確的移液,您的實驗將無法重現,您的儲備溶液將不準確,并且您的分析會有如此大的誤差,以致于對它們進行比較將毫無意義。但幸運的是,您無需擔心——您信賴的精密微量移液器會為您處理好這些。

還是他們?

它們可能是精密儀器,但您的微量移液器的準確性取決于您。您需要維護您的移液器,了解它們的工作原理,并練習良好的技術。只有掌握了這些方面,您才能聲稱擁有諸如精密儀器之類的東西可供您使用。這是我們準確移液的萬無一失的指南。

了解移液器的工作原理

  1. 您最有可能使用空氣置換移液器

空氣置換移液器的工作原理有點像注射器,不同之處在于活塞和樣品之間有一個充氣墊。氣墊可防止活塞與溶液接觸。將溶液和移液管分開是好的,但它也對移液器施加了一些限制。

溫度和壓力會影響氣墊的體積,從而影響移液精度。此外,揮發性溶劑會蒸發到氣墊中,從而導致分配體積不準確且低于移液器上顯示的體積。

空氣置換移液器的桶也容易受到移液溶液的污染。如果您正在使用腐蝕性物質或生物危險材料,這可能是一個問題。

  1. 不要使用空氣置換移液器(取決于您的應用?。?/span>

本文中的大部分信息都與空氣置換移液器有關,但有時容積式移液器可能是更好的選擇。容積式移液器也像注射器一樣工作,但它們沒有氣墊。這使得它們在移取揮發性溶劑時更加準確,因為溶劑沒有蒸發的地方(氣墊)。

沒有氣墊也減少了移取腐蝕性物質和生物危險材料時受到污染的機會,這使得正排量移液器更適合處理這些試劑。這些移液器價格昂貴,因為槍管和吸頭是一個單元,移液時都需要更換。

一種更便宜的替代方法是使用帶有屏障吸頭的空氣置換移液器,但這只能解決一些問題。

照顧好您的移液器

  1. 每 6-12 個月維修一次移液器

這是一個粗略的指南;根據您對準確性的要求,您需要更頻繁地對其進行維修。服務應包括重新校準、給運動部件加潤滑脂以及更換任何磨損的密封件或其他部件。最好由經驗豐富的移液器醫生完成此操作。

  1. 每天檢查移液器是否損壞

檢查槍管的鼻子(安裝尖端的地方)是否有任何明顯的損壞。如果出現問題,請對其進行維修——因為它不太可能適合這項工作。

  1. 每天使用前清潔移液器

應該用一些 70% 的乙醇擦拭移液器。

  1. 使用移液器支架垂直存放移液器

以這種方式存放移液器可以防止移液器桶中的任何液體進入移液器內部并導致腐蝕。

  1. 切勿將移液器放在吸頭有液體的一側

沒有什么可以阻止液體滾落到移液管中(請記住,只有空氣才能將液體與移液管分開)。移液管內的任何液體至少會導致污染,并可能導致嚴重的腐蝕損壞。

  1. 使用合適的小貼士

在吸取和分配液體時,安裝不當的吸頭會導致空氣逸出,從而導致結果不準確。

準確的移液依賴于良好的技術

  1. 確保您知道如何正確移液

有關基礎知識,請查看Gilson 的移液技術手冊。要遵循的最重要的規則是:

  • 移液器動作緩慢、平穩;

  • 吸取液體時垂直握住移液器;

  • 吸取液體時,僅將吸頭稍微浸入 - 否則,您將在吸頭上涂上液體,液體將隨移液器內的體積一起轉移;

  • 分配液體時,垂直握住移液器,但使接收容器的側壁保持 45 度角。移液器靠在側壁上或移入已經存在的液體中。

10. 測試你的準確性

通過將 100 μL 分配到精細天平上來檢查您的移液技術的準確性。您制作的液滴的質量應約為 0.1 克?,F在做同樣的事情 10 次并記錄你獲得的質量。如果變化超過 +/-0.5%,那么您要么需要重新評估您的移液技術,要么多加練習!

提高移液準確度的技巧

  1. 預潤濕移液器吸頭

當您從移液器分液時,吸頭上會留下一層液體,這使得分液量略小于移液器上顯示的量。移液前預先潤濕吸頭將有助于提高準確度。

要預先潤濕您的吸頭,請將液體吸入移液器,然后將其分配回原來的容器中。涂層在尖端?,F在,當您再次吸取液體并將其分配到接收容器中時,沒有任何液體會留在吸頭上并因潤濕而流失。這僅推薦用于大于 10 μL 的體積。

  1. 反向移液

在移取粘性液體或揮發性溶劑時使用此技術。當移液 0.5 μL 或更少的超微量樣品時,反向移液也有幫助。將活塞向下推至吹掃位置(第二個停止位置),然后向上吸取液體。此時吸頭中的液體過多。

但是,當通過將活塞推到吸液位置(第一個停止位置)來分配液體時,多余的液體會留在吸頭內。

使用這種方法,尖端是“自動”預潤濕的。額外的液體在移取揮發性溶劑時也有幫助,因為一些溶劑會蒸發到氣墊中。

  1. 考慮環境溫度

校準移液器的個人或公司可能是在室溫下進行校準的。如果您在不同的溫度下工作(例如在冷藏室),那么您的移液器將不會分配顯示的體積。

  1. 考慮樣品溫度

當重復移取冷樣品時,第一次分配的體積總是比預期的大,但隨后用相同的吸頭移液得到了正確的體積。熱樣品也是如此,只是第一次分配的體積比預期的要小。

他們的解決方案很簡單——為了準確移液,將第一體積分裝回原始容器,然后開始移液。

  1. 使用靈敏的移液器來分配您想要分配的體積

隨著分配體積接近移液器可以處理的最小值,移液器的準確度會降低。例如,如果您要分配 15 μL,那么 1 mL 移液器會很糟糕,200 μL 移液器不太好,而 20 μL 移液器是理想的。

  1. 使用盡可能大的容量

大體積比小體積更容易準確移液。假設您正在執行一項必須吸取 5 μL 的檢測。準確地移取這么少的量并不容易,并且可能會極大地導致結果中的統計誤差。

另一方面,您可以將儲備溶液稀釋 10 倍,然后吸取 50 μL 溶液。您可以輕松準確地吸取這個量,這會產生更嚴格的誤差線。

  1. 最后,這是獲得最大精度的方法

分析天平比任何移液器都更準確。為獲得最大準確度,請使用移液器分配您需要的體積,但將其放入天平上的稱重容器中。然后,根據質量計算實際移液體積(使用公式體積 = 質量/密度)。當然,這只適用于已知密度的溶液——但對于密度為 1 的水溶液,這不是問題


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